如何避免星号活性-星号-生物学习资料

在非标准条件下,有些内切酶可在与其识别序列相似但不完全相同的位点发生切割反应.这种非特异性的切割即所谓的“星号活性”.研究表明,星号活性是限制性内切酶的普遍特征,且任何一种内切酶在特定极端条件下都会产生这种非常规序列切割.

可能引起星号活性的因素之一：

甘油浓度过高（5% V/V）内切酶均贮存于50%的甘油中,因此内切酶的加入量不应该超过总体积的10%.建议使用50ul标准反应体系,这样可以减少蒸发,蒸发可引起甘油浓度升高并导致星号活性.

可能引起星号活性的因素之二：

酶/DNA浓度比过高

（100units/ug DNA）

使用尽量少的酶,这样可以避免过度消化,也可以降低甘油浓度.

可能引起星号活性的因素之三：

非最适缓冲液

尽量使用推荐的缓冲液,缓冲液中不同的离子浓度和pH值可导致星号活性.

可能引起星号活性的因素之四：

反应时间过长

使用尽量短的时间完成消化.长时间的温育可导致星号活性,也可导致蒸发.

可能引起星号活性的因素之五：有机溶剂（eg.DMSO、乙醇、乙二醇、乙酰二甲胺、二甲基甲酰胺）

如果可以,反应中不应有任何有机溶剂,DNA制备时残留的乙醇会导致星号活性.

可能引起星号活性的因素之六：

其他二价阳离子替代了Mg2+应当使用Mg2+作为反应中所需的二价阳离子,其他二价阳离子可能不能与内切酶的活性位点正确结合,这样就改变了其识别序列.

类似问题

类似问题1：如何避免星号活性[生物科目]

在非标准条件下,有些内切酶可在与其识别序列相似但不完全相同的位点发生切割反应.这种非特异性的切割即所谓的“星号活性”.研究表明,星号活性是限制性内切酶的普遍特征,且任何一种内切酶在特定极端条件下都会产生这种非常规序列切割.

可能引起星号活性的因素之一：

甘油浓度过高（5% V/V）内切酶均贮存于50%的甘油中,因此内切酶的加入量不应该超过总体积的10%.建议使用50ul标准反应体系,这样可以减少蒸发,蒸发可引起甘油浓度升高并导致星号活性.

可能引起星号活性的因素之二：

酶/DNA浓度比过高

（100units/ug DNA）

使用尽量少的酶,这样可以避免过度消化,也可以降低甘油浓度.

可能引起星号活性的因素之三：

非最适缓冲液

尽量使用推荐的缓冲液,缓冲液中不同的离子浓度和pH值可导致星号活性.

可能引起星号活性的因素之四：

反应时间过长

使用尽量短的时间完成消化.长时间的温育可导致星号活性,也可导致蒸发.

可能引起星号活性的因素之五：有机溶剂（eg.DMSO、乙醇、乙二醇、乙酰二甲胺、二甲基甲酰胺）

如果可以,反应中不应有任何有机溶剂,DNA制备时残留的乙醇会导致星号活性.

可能引起星号活性的因素之六：

其他二价阳离子替代了Mg2+应当使用Mg2+作为反应中所需的二价阳离子,其他二价阳离子可能不能与内切酶的活性位点正确结合,这样就改变了其识别序列.

类似问题2：限制酶的产品上的星号活性是?限制酶的产品上会标有星号活性,这个星号活性是什么?

说明该酶有星活性.如果酶切时加入太多的酶,甘油浓度超过一定的值,该酶的酶切位点会发生改变,所以要避免星活性

类似问题3：怎么打出来星号

在键盘上同时按shift键和字母键上方的‘8’键

类似问题4：怎样才能有这个星号

微博达人

有头像,微博帐号已成功绑定手机,粉丝数不低于100,关注数不低于100,微博等级3级/3级以上,有效互粉数不低于30,大概就这些咯,

类似问题5：下面算式中,星号,圆圈,三角形各代表什么?1、星号+圆圈=18 星号=圆圈+圆圈 星号=（ ） 圆圈=（ ）2、圆圈+圆圈+三角形+三角形=38三角形+圆圈+圆圈=22三角形=( ) 圆圈=（ ）[数学科目]

- -

相当于是二元一次方程组

1.将 星号=圆圈+圆圈 代入 星号+圆圈=18 可得 3X圆圈=18

所以 圆圈=6 再将 圆圈=6 代入 得 星号=12

2.也是类似的方法 希望你能举一反三 自己试试

答案我先说 三角形=16 圆圈=3