为什么氨基酸的纸层析中缬氨酸跑的比赖氨酸快-缬氨酸溶
2017年04月03日发布
纸层析用的是水为固定相,有机相为扩张剂.
缬氨酸的疏水性比赖氨酸强,它在无机相中的溶解度也高.
所以在水及有机相的不断分配中,赖氨酸在水中滞留的时间要比缬氨酸多,自然跑的慢了.
类似问题
类似问题1:氨基酸纸层析为什么会出现拖尾现象[生物科目]
究其原因,经自己多次亲手操作,多次反复对比,始悟出一些道理,叙述如下:拖尾现象是指展层,显色后在层析分配图上,所看到的某一种氨基酸的分子位移,不是如标准图谱所示的那样,完整地显示在某一位置上,而是形成象笤帚似的那样,前端粗圆而逐渐细小下来,宛如拖着一个尾巴.其图所呈颜色也是由浓渐淡.其图象的出现,原认为是在实验中,对影响Rf值的主要因素要求,掌握不够所致.诸如,物质结构与极性对Rf值的影响,层析溶剂对Rf值的影响,PH对Rf值的影响(溶剂、滤纸和样品的PH值),温度对Rf值的影响,滤纸的质地是否均匀,薄厚是否适当,纤维的松紧度是否适中等对Rf值的影响,展层的方式(上行、下行)对Rf值的影响.然而在多次实验过程中无论怎佯严格遵循其影响Rf值的主要因素的要求,都仍不可避免地要出现拖尾现象.此时,这就需要从具体操作规范方面,诸如样品的处理,点样、展层、显色等几个操作程序去考虑思索,经仔细分析,样品的处理是为除去杂质纯化样品,达到层析分配某氨基酸的情晰显色图像;展层过程是在上述影响Rf值的主要因素要求下
进行,使样品达到一个适当的位移,便于在显色后从图象上,区分不同样品的氨基酸;显色是在用配制好的,与水不相混合,并挥发性较快的 邑剂喷雾后迅速吹干的.更何况显色剂又是含水量极低,不会影响洋品的斑点扩散,那么问题就集中在点样这个操作程序上了.点样是将被层析分配的几种氨基酸混合液,和为了对照实验结果,而分别配制的几种氨基酸的溶液,用微量点样管或毛细管,或血球计数器将5一j5微升的样品,点在以滤纸为惰性支持物的层析纸上设计好的多点位置中去.点样后要自然风干,或冷风吹干.最好不要用加热装置,如吹风机,灯泡之类的热源将其样品点加速干燥.因为加热装置在学生操作时,一但注意不够,掌握不好,则温度升高势必要使样品破坏,更会使佯品点干的太燥.正是由于这样,样品点太干燥,使其样品物的分子,牢固地吸牢在层析纸的纤维上.所以在展层过程中,样品点的每个物质分子,不能在层析纸上同时起步,而是形成了有先有后,鱼贯而上行或下行的状况,最终使洋品物质的分子,不能同时都集中到达一个位置.致使在显色后,实验结果的图象上,观察到的不是一个完整的斑点,而是一个拖着尾巴的斑点.这就是上述所说的拖尾现象.
卤、结束语 ’
纸上分配层析所出现的拖尾现象,究其原因很简单,就是在点样品后,样品点吹的太干燥所致.原因太简单了,往往被人们容易忽略,更引不起人们的重视.但它确实在困扰着人们的实验效果.为此,建议应在该实验的点样操作中,加上一句,“样品点不要砍的太干燥,否则,样品物质的分子,会牢吸在层析纸的纤维上,出现拖尾现象”.
摘自:
1994年 3期《晋东南师专学报》:-67-67,95
关于对用“纸层析法分离鉴定氨基酸”实验中出现拖尾现象的分析
赵晋德
类似问题2:甘氨酸、缬氨酸和丙氨酸分别在纸层析中的层析行为如何?[生物科目]
不同的氨基酸Rf值不同,层析时速度有快有慢.
Rf和氨基酸的极性和疏水性有关.极性越大,疏水性越小,Rf值越小.
三种氨基酸中应该是缬氨基酸的Rf最大,甘氨基酸(极性最大)的Rf最小.
所以,纸层析时跑得最快的是缬氨酸,最慢的是甘氨酸.
类似问题3:氨基酸的纸层析分离原理是什么?[化学科目]
纸层析法(paper chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定.纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相.在层析时,将样品点在距滤纸一端约2~3cm的某一处,该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基酸在两相中不断分配,由于分配系数(Kd)不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值(rate of flow,Rf)来表示.所谓Rf,是指在纸层析中,从原点至氨基酸停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值:
在一定条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关.
^__^
类似问题4:氨基酸纸层析的原理是什么[化学科目]
纸层析法(paper chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定.纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相.在层析时,将样品点在距滤纸一端约2~3cm的某一处,该点称为原点;然后在密闭容器中层析溶剂沿滤纸的一个方向进行展层,这样混合氨基酸在两相中不断分配,由于分配系数(Kd)不同,结果它们分布在滤纸的不同位置上.物质被分离后在纸层析图谱上的位置可用比移值(rate of flow,Rf)来表示.所谓Rf,是指在纸层析中,从原点至氨基酸停留点(又称为层析点)中心的距离(X)与原点至溶剂前沿的距离(Y)的比值:
在一定条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构、性质、溶剂系统、温度、湿度、层析滤纸的型号和质量等因素有关.
类似问题5:纸层析中为什么缬氨酸比脯氨酸跑得快[生物科目]
因为缬氨酸的非极性高于脯氨酸,在有机流动相中溶解度大,所以跑得较快.